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動態光散射技術的應用
內容
動態光散射技術的應用
溶液中的顆粒物質(如生物大分子、高分子聚合物、膠束等),其顆粒大小的變化往往可以反應出某些性質方面的變化。由于光散射實際上是首先
通過測量大分子物質的擴散系數,進而推導出其它參數。所以,光散射不僅可以用來進行靜態測量,還可以檢測一些動態過程的變化。
下面以大家熟悉的生物學中的幾個具體實例來介紹動態光散射技術的應用。
1.測定蛋白質分子的均一性
蛋白質樣品的均一性是生長晶體的前提條件,在無法直接觀察蛋白質在溶液中狀態的情況下,生長晶體是一個需要經驗和運氣的過程。但是用光散射技術,只需要幾分鐘就可以確切地告訴你,這個樣品是否有長出晶體的可能性。你還可以測定蛋白在不同溶液中的狀態,從而確定出哪種溶液最適合生長晶體。
2.測定蛋白質分子的pH穩定性
有些蛋白質分子在不同的pH值條件下,會有不同的構型,或者形成聚合態,或是變性。如胰島素在pH2.0時是以單體存在,而在pH3.0時則以二聚體形式存在,當pH升至7.0時則以六聚體存在。因為這種變化表現為大小的變化,所以光散射技術可以用來測定蛋白質分子的pH穩定性。
3.測定蛋白質分子的熱穩定性
對一些熱不穩定的蛋白,溫度改變會導致分子變性聚合,因此可以觀察到分子半徑明顯增大。所以可以利用光散射技術來研究蛋白質分子的熱穩定性。
4.蛋白質變復性及折疊的研究
蛋白質變性時往往是以聚合形式或較松散的狀態存在,復性后,蛋白質折疊成天然狀態,會發生結構的變化,這一變化可以導致流體動力學半徑的變化,所以光散射技術可以用來檢測這一動態變化的過程。
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